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生物資訊

肝癌細胞株Bel-7402中側群細胞的分離和致瘤能力

作者:楊艷輝 整理 來源:醫(yī)學論壇網 發(fā)布時間: 2014-07-18 10:53  瀏覽次數(shù):
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近日,浙江大學醫(yī)學院附屬第二醫(yī)院普通外科研究人員發(fā)表論文,旨在分選肝癌Bel-7402細胞中的側群(SP)細胞并分析其生物學特性。研究指出,肝癌Bel-7402細胞中的SP細胞可能富集了肝癌干細胞。該文發(fā)表在2013年第05期《中山大學學報(醫(yī)學科學版)》雜志上。

  采用流式細胞熒光激活分選(FACS)技術將Bel-7402細胞分為SP細胞和非側群(NSP)細胞2亞群。實驗分組:SP組與NSP組。細胞生長曲線法和平板克隆法比較SP細胞和NSP細胞的增殖能力和克隆形成能力;RT-PCR法檢測SP細胞和NSP細胞的CD133、三磷酸腺苷結合盒轉動蛋白G2(ABCG2)表達;流式細胞術分析細胞凋亡率;無血清培養(yǎng)法檢測SP細胞及NSP細胞成球率;非肥胖糖尿病/嚴重聯(lián)合免疫缺陷(NOD/SCID)小鼠體內成瘤實驗比較SP細胞和NSP細胞的致瘤性。

  Bel-7402細胞中分選出的SP細胞比例為(2.4±0.0)%。生長曲線表明SP細胞的增殖速度快于NSP細胞(P<0.05)。SP、NSP細胞的克隆形成率分別為(20.5±2.6)%、(5.1±0.9)%,兩者差異明顯(P<0.05)。SP細胞ABCG2 mRNA和CD133 mRNA平均表達水平分別是NSP細胞的3.03倍(P<0.01)和1.98倍(P<0.01)。SP細胞凋亡率為(0.89±0.23)%,低于NSP細胞(P<0.05)。在無血清培養(yǎng)基中,SP細胞成球率為(14.1±1.9)%,高于NSP細胞(P<0.05)。1×103、104、105數(shù)量的SP細胞形成皮下移植瘤(P>0.05,P<0.05,P<0.05),而1×105NSP細胞則還不能成瘤。

 

 

 

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